La leucemia mieloide cronica (CML) è un tumore del sangue che colpisce ogni anno più di 4500 pazienti negli Stati Uniti e più di 7500 in Europa. La CML è causata da un riarrangiamento cromosomico che si traduce nella creazione di BCR/ABL1, una chinasi costituticamente attiva. L'attività incontrollata di questa chinasi determina l'accumulo di cellule mieloidi immature e la riduzione dei globuli rossi e piastrine nel sangue. Questi cambiamenti compromettono la funzione del sistema immunitario, di erogazione di ossigeno e coagulazione. Questa malattia rimane spesso silenziosa per molti anni in fase cronica (CP), ma se non trattata, procede alla fase più aggressiva e meno curabile, la fase blastica (BP). L'intervento con un regime terapeutico efficace nel più breve tempo possibile è quindi di fondamentale importanza. L'odierno approccio clinico prevede l'individuazione di mutazioni del dominio di BCR-ABL1 chinasi solo nei pazienti con una prima risposta inadeguata agli inibitori tirosin chinasici (Resistenza primaria). La mancanza di risposta iniziale può essere rilevata solo dopo un minimo di 3-12 mesi dalla diagnosi.La capacità di capire come i pazienti rispondono ai farmaci al momento della diagnosi, con una semplice analisi del sangue periferico potrebbe aiutare i medici a prescrivere trattamenti su misura per il paziente diminuendo l'insorgenza di future resistenze ai farmaci. Il test che proponiamo si basa sull'utilizzo di un peptide sintetico con elevata specificità per BCR-ABL1. Il test utilizza anticorpi per rilevare la fosforilazione del peptide che avviene usando lisati di sangue periferico o midollo osseo.

Chronic Myelogenous Leukemia (CML) is a blood cancer that affects each yearmore than 4500 patients in USA and more than 7500 in Europe. CML is caused byan acquired chromosomal rearrangement that results in the creation of BCR-ABL1, an abnormally active kinase. The uncontrolled activity of this kinasedetermines the accumulation of immature myeloid cells and the reduction of redblood cells and platelets in the blood stream. These changes compromise thefunction of immune system, oxygen delivery and coagulation. This diseaseremains often silent for many years in a so-called chronic phase (CP), but if leftuntreated, it proceeds to the more aggressive and least treatable accelerating(AP) and blastic phases (BP). Intervening with an effective therapeutic regimenin the shortest time possible is therefore of paramount importance.The standard clinical approach prescribes the detection of BCR-ABL1 kinasedomain mutations only in patients with an inadequate initial response to TKIs(primary resistance). The lack of initial response can be detected only after aminimum of 3-12 months from the diagnosis.The ability to understand how patients respond to drugs at diagnosis with asimple analysis of peripheral blood would help clinicians to prescribe morepatient-tailored treatments decreasing the insurgence of future drug resistance.The test assay we are proposing is based on an immobilized syntheticallyoptimized peptide with a high specificity for BCR-ABL1. The test uses antibodiesto detect the occurred peptide phosphorylation from appropriately preparedperipheral blood or bone marrow cell lysates.

IMMOBILIZED KINASE ACTIVITY BIOSENSORS FOR ABL KINASE IN CHRONIC MYELOID LEUKEMIA

Fiorini, Zeno
2016-01-01

Abstract

Chronic Myelogenous Leukemia (CML) is a blood cancer that affects each yearmore than 4500 patients in USA and more than 7500 in Europe. CML is caused byan acquired chromosomal rearrangement that results in the creation of BCR-ABL1, an abnormally active kinase. The uncontrolled activity of this kinasedetermines the accumulation of immature myeloid cells and the reduction of redblood cells and platelets in the blood stream. These changes compromise thefunction of immune system, oxygen delivery and coagulation. This diseaseremains often silent for many years in a so-called chronic phase (CP), but if leftuntreated, it proceeds to the more aggressive and least treatable accelerating(AP) and blastic phases (BP). Intervening with an effective therapeutic regimenin the shortest time possible is therefore of paramount importance.The standard clinical approach prescribes the detection of BCR-ABL1 kinasedomain mutations only in patients with an inadequate initial response to TKIs(primary resistance). The lack of initial response can be detected only after aminimum of 3-12 months from the diagnosis.The ability to understand how patients respond to drugs at diagnosis with asimple analysis of peripheral blood would help clinicians to prescribe morepatient-tailored treatments decreasing the insurgence of future drug resistance.The test assay we are proposing is based on an immobilized syntheticallyoptimized peptide with a high specificity for BCR-ABL1. The test uses antibodiesto detect the occurred peptide phosphorylation from appropriately preparedperipheral blood or bone marrow cell lysates.
2016
BIOSENSORS, CHRONIC MYELOID LEUKEMIA, TRANSLATIONAL BIOMEDICAL SCIENCES,TYROSINE KINASE ASSAY
La leucemia mieloide cronica (CML) è un tumore del sangue che colpisce ogni anno più di 4500 pazienti negli Stati Uniti e più di 7500 in Europa. La CML è causata da un riarrangiamento cromosomico che si traduce nella creazione di BCR/ABL1, una chinasi costituticamente attiva. L'attività incontrollata di questa chinasi determina l'accumulo di cellule mieloidi immature e la riduzione dei globuli rossi e piastrine nel sangue. Questi cambiamenti compromettono la funzione del sistema immunitario, di erogazione di ossigeno e coagulazione. Questa malattia rimane spesso silenziosa per molti anni in fase cronica (CP), ma se non trattata, procede alla fase più aggressiva e meno curabile, la fase blastica (BP). L'intervento con un regime terapeutico efficace nel più breve tempo possibile è quindi di fondamentale importanza. L'odierno approccio clinico prevede l'individuazione di mutazioni del dominio di BCR-ABL1 chinasi solo nei pazienti con una prima risposta inadeguata agli inibitori tirosin chinasici (Resistenza primaria). La mancanza di risposta iniziale può essere rilevata solo dopo un minimo di 3-12 mesi dalla diagnosi.La capacità di capire come i pazienti rispondono ai farmaci al momento della diagnosi, con una semplice analisi del sangue periferico potrebbe aiutare i medici a prescrivere trattamenti su misura per il paziente diminuendo l'insorgenza di future resistenze ai farmaci. Il test che proponiamo si basa sull'utilizzo di un peptide sintetico con elevata specificità per BCR-ABL1. Il test utilizza anticorpi per rilevare la fosforilazione del peptide che avviene usando lisati di sangue periferico o midollo osseo.
9788869250514
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