Metabolismo lipidico nel fegato: approccio immunocitochimico in un mammifero ibernante

Lo scopo di questa tesi e` quello di studiare l’espressione di alcuni enzimi del metabolismo lipidico in cellule epatiche di un mammifero ibernante, il moscardino (Muscardinus avellanarius), nelle diverse fasi del ciclo annuale. Infatti il metabolismo lipidico subisce profonde modificazioni nel corso del ciclo annuale dell’animale ibernante (fase di attivita`, fase di ibernazione e fase di risveglio primaverile) e questo potrebbe essere associato a variazioni nella espressione o nell’attivita` di enzimi. In particolare per questa ricerca abbiamo focalizzato la nostra attenzione su due enzimi chiave della via di sintesi e del catabolismo degli acidi grassi: Acido grasso sintetasi (FAS) Acil CoA sintetasi (ACSL-1) La loro espressione è stata analizzata nel fegato per il ruolo critico giocato da questo organo nel metabolismo dei lipidi. L’espressione di questi enzimi e` stata studiata tramite immunolocalizzazione ultrastrutturale, tecnica che permette una visualizzazione ad alta risoluzione dei comparimenti cellulari associata con la localizzazione di molecole funzionali nei compartimenti stessi. In particolare il lavoro si e` svolto nei seguenti step sperimentali: Valutazione della qualita` morfologica dei campioni di fegato prelevati da moscardino ed inclusi in resina per la microscopia elettronica Messa a punto del protocollo immunocitochimico per la rivelazione dei due enzimi scelti Marcatura immunocitochimica dei due enzimi in moscardini nelle tre fasi del ciclo annuale con valutazione della distribuzione della marcatura nei diversi compartimenti cellulari Analisi semi-quantitativa della densita` di marcatura dei due enzimi nelle tre diverse fasi del ciclo annuale e analisi statistica della densita` di marcatura osservata

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