The role of the tumor microenvironment in cerebral glioma progression

sfondo: Il tumore associato macrofagi (TAMs) sono classificati in pro-infiammatorio M1 TAM, e anti-infiammatori M2 TAM. Le cellule staminali glioma (GSC) polarizzano TAM in M2 fenotipo che promuovono la progressione glioma. E voluto studiare l'implicazione della infiltrazione totale e differenziale TAM in gliomi a basso grado (LGG) e in gliomi a alto grado (HGG). Inoltre abbiamo studiato l'effetto di esosomi rilasciati da M1 TAM sul destino delle cellule di glioma. Metodologia: immunoistochimica è stata eseguita su 11 campioni accoppiati ottenuti da casi di progressione da LGG a HGG. iNOS è stato utilizzato come marcatore per M1 e CD163 come marcatore per M2. Negli esperimenti in vitro, abbiamo polarizzato monociti umani U937 in M1 fenotipo, poi abbiamo isolato i esosomi dal mezzo M1 condizionato con centrifugazione e filtrazione. Dopo aver aggiunto esosomi M1 di cellule di glioma U251, abbiamo studiato l'attivazione delle cellule glioma con il saggio MTT e abbiamo studiato l'apoptosi delle cellule glioma con la citofluorimetria. Abbiamo usato annessina V come marcatore di apoptosi precoce e ioduro di propidio come marcatore di ritardo apoptosi. Risultati: immunoistochimica ha mostrato uno squilibrio M1 / ​​M2 con la maggioranza di essere M2 sia LGG e HGG. La M2 infiltrazione superiore, la prima è stata la progressione. Gli esperimenti in vitro hanno rivelato l'effetto antitumorale di exosomes M1 che erano in grado di inibire la proliferazione e di indurre apoptosi precoce e tardiva delle cellule di glioma. Conclusione: i nostri dati confermano il ruolo di M2 TAM nella progressione di glioma ed espostano il ruolo tumoricidale di esosomi M1 contro i gliomi

Background: The tumor associated macrophages (TAMs) are classified into pro-inflammatory M1 TAMs, and anti-inflammatory M2 TAMs. Glioma stem cells (GSCs) polarize TAMs into M2 phenotype which promote glioma progression. We aimed to study the implication of the total and differential TAM infiltration in low grade glioma (LGG) and high grade glioma (HGG). Also we investigated the effect of exosomes released from M1 TAMs on the fate of glioma cells. Methodolgy: Immunohistochemistry was performed on 11 paired specimens obtained from cases progressing from LGG to HGG. iNOS was used as a marker for M1 and CD163 as a marker for M2. In the in-vitro experiments, we polarized human monocytes U937 into M1 phenotype, then we isolated the exosomes from the M1conditioned medium by centrifugation and filtration. After adding M1 exosomes to U251 glioma cells, we studied the glioma cell activation by MTT assay and we studied the glioma cell apoptosis by flow-cytometry. We used Annexin V as a marker of early apoptosis and propidium iodide as a marker of late apoptosis. Results: immunohistochemistry showed an M1/M2 imbalance with the majority being M2 in either LGG and HGG. The higher M2 infiltration, the earlier was the progression. The in-vitro experiments revealed the anti-tumor effect of M1 exosomes which were able to inhibit the proliferation and to induce early and late apoptosis of glioma cells. Conclusion: our data confirmed the role of M2 TAMs in glioma progression and exhibited the tumoricidal role of M1 exosomes against gliomas.